Humboldtpinguine leben an den Pazifikküsten in Peru und Nordchile und auf den dort vorgelagerten Inseln. Sie kommen entlang einer 4.500 Kilometer langen Küstenlinie zwischen dem fünften und dem 42. südlichen Breitengrad vor. Die Weltnaturschutzunion stuft die Art auf der IUCN Red List of Threatened Species als „gefährdet“ ein. Gründe sind die menschliche Bejagung der Tiere sowie die Überfischung vor den Brutgebieten, der Klimawandel und die damit verbundenen Veränderungen in der Natur aber auch der Abbau von Guano. Der Zoo Karlsruhe beteiligt sich am Erhaltungszuchtprogramm für Humboldtpinguine der EAZA – the European Association of Zoos and Aquaria.